Kolistin ELISA Test Kütesi Yüksek Reprodüksiyon Yüksek Duyarlılık

Örneklerin uygun şekilde saklandığından emin olun. Genel olarak, örnekler 2-4°C'de en fazla 1-2 gün soğutmalı.

Dondurulmuş numuneler oda sıcaklığında çözülebilir (20 °C 25 °C)- Evet.C / 68 ¢ 77- Evet.F) veya kullanılmadan önce buzdolabına koyulur.

1. 1X Kolistin Ekstraksiyon tamponu I hazırlanması:

10 X Kolistin Ekstraksiyon tamponu I'nin 1 hacmi 9 hacmi damıtılmış suyla karıştırın.

2Et ekstraksiyonu için 1X Kolistin Ekstraksiyon tamponu II hazırlama6X Colistin Extraction Buffer II'nin 1 hacmi 5 hacmi damıtılmış suyla karıştırın.

3Yem ve karides ekstraksiyonu için 3X Kolistin Ekstraksiyon tamponu II hazırlama6X Colistin Extraction Buffer II'nin 3 hacmi 3 hacmi damıtılmış suyla karıştırın.

Et(sığır eti, domuz eti ve tavuk)

1Etten yağ çıkarılır, uygun bir karıştırıcıyla makul miktarda numune homogenize edilir.

2Homogenize edilmiş et örneğinin 1 g'ini tartın, 3,5 ml 1X Kolistin Ekstraksiyon tamponu I ve 500 uL 1X Kolistin Ekstraksiyon tamponu II ekleyin, 3 ml n-heksan girdabı ekleyin veya 3 dakika karıştırın.

3Oda sıcaklığında 4000 x g'de 10 dakika santrifuge (20 25- Evet.C / 68 ¢ 77- Evet.F.) 4. N-heksan katmanını aspirasyona alıp atın, daha sonra 500 I.L. süpernatantı 200 I.L. 10X Kolistin Ekstraksiyon tamponu içeren yeni bir tübe aktarın.% 100 etanol ve 100 litre kolistin dengeleyici.

5- En yüksek hızda 30 saniye fırlatın.

6ELISA testinde kuyu başına 75 IU kullanın.

Not: Seyreltilme faktörü:10 Et tozu

1Uygun bir karıştırıcı ile makul bir miktar numune homojenleştirin.

2Homogenize edilmiş numunenin 0,5 g'ini tartın, 3,5 ml 1X Kolistin Ekstraksiyon tamponu I ve 500 uL 1X Kolistin Ekstraksiyon tamponu II ekleyin, 3 ml n-heksan girdabı ekleyin veya 3 dakika boyunca sallayın.- Evet.Örnek Hazırlığı

N3Oda sıcaklığında 4000 x g'de 10 dakika santrifuge (20 25- Evet.C / 68 ¢ 77- Evet.F)

4N-heksan katmanını aspirasyona alıp atın, sonra 500 I.L. süpernatantı, 200 I.L. 10X Kolistin Ekstraksiyon tamponu içeren yeni bir tübe aktarın.% 100 etanol ve 100 litre kolistin dengeleyici.

5- En yüksek hızda 30 saniye fırlatın.

6ELISA testinde kuyu başına 75 IU kullanın.

Not: Seyreltilme faktörü: 16. Besin.

1Uygun bir karıştırıcı ile makul bir miktar numune homojenleştirin.

2Homogenize edilmiş numunenin 0,5 g'ını tartın, 2 ml 0,1 M HCl ve 2 ml n-heksan ekleyin ve 3 dakika boyunca yüksek hızda girdaplar halinde karıştırın.

3Oda sıcaklığında 4000 x g'de 10 dakika santrifuge (20 25- Evet.C / 68 ¢ 77- Evet.4. N-heksan tabakasını aspirasyon ve atmak, sonra temiz bir santrifüj tüpüne 200uL supernatant aktarmak, 1 150uL eklemek×Kolistin Ekstraksiyon tamponu I ve 30 saniye boyunca yüksek hızda sallayın.

5ELISA testinde kuyu başına 75 IU kullanın.

Not: Seyreltilme faktörü:8.75 Balık/Karides

1Uygun bir karıştırıcı ile makul bir miktar numune homojenleştirin.

2Homogenleştirilmiş et örneğinin 1.0 g'ini tartın, 3,5 ml 1X Kolistin Ekstraksiyon tamponu I ve 500 uL 3X Kolistin Ekstraksiyon tamponu II ekleyin, 3 ml n-heksan girdap ekleyin veya 3 dakika boyunca sallayın.

3Oda sıcaklığında 4000 x g'de 10 dakika santrifuge (20 25- Evet.C / 68 ¢ 77- Evet.F) 4. N-heksan tabakasını aspirasyon ve atmak, sonra 300uL damıtılmış su, 200uL 10X Colistin Ekstraksiyon tamponu içeren yeni bir tüpe 200L supernatant aktarmak,% 100 etanol ve 100 litre kolistin dengeleyici.

5- En yüksek hızda 30 saniye fırlatın.

6ELISA testinde kuyu başına 75 IU kullanın.

Not: Seyreltilme faktörü:25